吉林赭曲霉亲和柱厂家常用解决方案 中检维康技术有限公司

亲和柱的应用

应用：牛奶中M1的测定

（参考方法GB 541337-2010 食品安全***标准 乳和乳制品中M1 的测定）

样品前处理

称取50g牛奶到具塞离心管中，在水浴中加热到35-37℃，4000转离心15min，除去上层乳脂，全部样品待过柱净化

样品过柱净化

1. 将亲和柱（SBHL-20-0245）连接于10ml或50ml***管下。

2. 将处理好的样品全部通过亲和柱，控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。（注意：空气不能通过柱体）

3. 以稳定的流速淋洗柱子两次，弃去全部流出液，并使2mL-3mL空气通过柱体。

4. 洗脱，流速为1mL/min-2mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。

亲和柱亲和层析过程中的注意事项

1、上样

亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。

2、洗脱

亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。

亲和柱——亲和层析的用途

简单来说，亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。

亲和层析常见的用途是纯化重组蛋白。亲和层析是从粗混合物中纯化蛋白质或核酸的较佳选择。如果蛋白质的分子量，疏水性，电荷等未知，亲和色谱法仍可适用于这种情况。一个典型例子是尝试分离具有特定活性的酶时，可以用与所选底物相似或相同的连接配体构建亲和柱。