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ELISA***盒的应用领域

ELISA法是诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的病种等方面的诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于流行病学调查。本法不仅可以用来测定，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物***各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：

1、酶染色各种细胞内成份的***。

2、研究抗酶的合成。

3、显现微量的沉淀反应。

4、定量检测体液中抗原或成份。

Elisa***盒操作注意事项

1．Elisa***盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请***后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按污染物处理。

9．本***不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

ELISA***盒主要实验原理

·包被：抗原或者能以物理性吸附于固相载体表面，原因是蛋白质和聚乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原反应等活性；

·标记：抗原或者可通过共价键与酶连接成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其活性和酶的催化特点；

·显色：酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者结合后，也被固定在固相载体上，加入酶的底物之后可出现显色反应，根据反应的颜色深浅可计算抗原或者的相对含量。