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发布时间:2022-05-12 11:29:36
固相萃取柱的影响因素
以下内容由北京中检维康生物技术有限公司为您提供,希望对同行业的朋友有所帮助。
保留体积
在加样过程中,保留体积是SPE 技术的关键因素之一,它代表了进行痕量富集时能有效处理的水样体积。根据色谱分析仪的小检出量和水样中有机物的浓度,可以估算出欲富集的小水样体积。另外,样液的pH 值也影响样品的吸附效率。
固相萃取柱规格填料的选择
固相萃取柱填料可以保证持续一致的填料粒径和比表面积,确保小柱高的回收率,每支、每批之间高的稳定性与重现性。
对于反相、正相和吸附型固相萃取柱来说,被萃取样品的质量不要超SPE 柱填料的5 %(同一种吸附剂对不同目标物的选择性不同。此数值仅供参考!);离子交换型的固相萃取柱,须考虑离子交换的容量。
固相萃取柱的尺寸选择
理想的固相萃取柱类型应该是内径和长度均较大。柱长加大,相应的塔板数则高,柱内径较大,进样后样品的原点则小(反映在柱子上就是样品层较薄),分离度变大。缺点是采用内径较大的萃取柱需较多的硅胶和溶剂,增加实验成本。现在常用萃取柱直径与长度比一般在1∶5~1∶10,固定相硅胶量是样品量的30~40倍。萃取柱较短内径较小,相应的塔板数则低,进样后样品的原点则大(反映在柱子上就是样品层较厚,样品层在固相萃取柱内小于0.5cm,各组分较容易完全分离),分离度变小。
如果所需组分和杂质分离度较大(所需组分分离度R>1),使用硅胶较少、内径较小的萃取柱(例如200毫克的样品,用2cm×20cm的柱子);如果所需组和杂质分离度较小(所需组分分离度R<1),可以加大萃取柱内径,也可使用极性较小的淋洗剂等。
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