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亲和柱的概念

亲和柱/亲和膜,都是医类分离器.如除内亲和柱,以Sepharose4B为基质，配基为组氨酸，壳聚糖，季铵盐等

实验采用亲和柱-荧光光度法快速测定了鲜牛乳及乳粉中M1.试样经过离心、脱脂、过滤后,滤液经过键合有M1特殊的亲和柱净化,此对M1具有专一的识别能力,M1键合在氯***、等亲和柱分离柱中的上.将亲和柱上杂质除去,通过分离柱洗脱,加入溶液衍生,以提高测定灵敏度.衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定M1,检测低限为0.01μg/kg,在0.1-1.0μg/kg范围内,回收率为89.6%-96.1%,变异系数为0.52%-5.8%,分析一个样品的时间小于30min.,分析过程中不使用M1标准物质.用FAPAS的参考标样证实了检测方法、分析仪器和操作人员得到的结果是准确可靠的。

亲和柱概述

#亲和柱净化法

亲和柱净化法是检测***常用的样品净化方法之一，具有特异性强、回收率高、净化效果好的特点，并且可以起到富集目标化合物的作用。特别适用于***等微量、衡量物质的回收测定。

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亲和柱亲和层析原理介绍

组氨酸是具有杂环的氨基酸，每个组氨基酸含有一个咪唑基团，这个化学结构带有很多额外电子，对于带正电的化学物质有静电引力，亲和层析是利用这个原理来进行吸附的，亲和配体（也就是填料）上的阳离子（一般是镍离子）带正电对组氨酸有亲和作用。组氨酸标签是原核表达载体上6个组氨酸的区段,这个标签在ph8.0时不带电,对蛋白质的分泌,折叠,功能基本上无影响.能高度亲和镍离子,用于蛋白质的亲和纯化.

亲和柱——亲和层析的应用

抗原和利用抗原、之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上，就可以从中分离其对应的。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低，用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离，而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原，经动物后制备，将与适当基质偶联形成亲和吸附剂，就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、间亲和力一般比较强，其解离常数为108－10?12M，所以洗脱时是比较困难的，通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、种类或使用类似物等来降低二者的亲和力，以便于洗脱。

另外金***球菌蛋白A（ProteinA）能够与球蛋白G（IgG）结合，可以用于分离各种IgG。